DNBの形成
DNAナノボールは一本鎖環状DNAライブラリをテンプレートとして、ローリングサークル増幅(RCA)により形成されます。様々なサイズのDNA断片は約100~1,000コピーに増幅されます。
シーケンスチップへのロード前に、DNB濃度はQubit測定により簡単に定量することができます。高額な定量化装置や試薬は必要ありません。ローリングサークル増幅(RCA)の主なメリットとしては、増幅におけるエラー発生率の減少が挙げられます。RCAには忠実度が極めて高いDNAポリメラーゼを使用し、サイクルごとにオリジナルコピーがテンプレートとして使用されます。これにより、DNBが100~1,000コピーに複製される間に、同じ位置で増幅エラーが蓄積することをを回避することができます。さらに、RCAテクノロジーではPCRなどの他の増幅手法で認められるような、エラー、GCバイアス、ドロップアウトの指数関数的な蓄積を避けることができます。これらすべてが、DNBSEQプラットフォームにおけるシーケンス精度の大幅な向上を実現します。